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PEG8000浓缩病毒注意事项 新手病毒纯化中peg6000沉淀不能溶解,求教

浏览 2166次发布时间:2024-05-04 

新手病毒纯化中peg6000沉淀不能溶解,求教

peg8000溶液直接水溶解
溶解性口诀
钾钠铵盐溶水快 ,①
硫酸盐除钡铅钙.②
氯化物溶氯化银,
硝酸盐溶液都透明.③
口诀未皆沉.④
溶解性口诀二
钾、钠、铵盐、硝酸盐;
氯化物除银、亚汞;
硫酸盐除钡铅;
碳酸、磷酸盐,溶钾、钠、铵.
溶解性口诀三
钾钠铵硝皆溶、盐酸盐溶银亚汞;
硫酸盐溶钡铅、碳磷酸盐溶.
数酸溶碱少溶、钾钠铵钡溶
溶解性口诀四
钾、钠、硝酸溶,(钾盐、钠盐硝酸盐都溶于水.)
盐酸除银(亚)汞,(盐酸盐除氯化银氯化亚汞外都溶.)
再说硫酸盐,容钡、铅,(硫酸盐溶硫酸钡硫酸铅.)
其余几类盐,(碳酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、硅酸盐硫化物)
溶钾、钠、铵,(相应钾盐、钠盐铵盐溶)
说碱类,钾、钠、铵钡.(氢氧化钾、氢氧化钠、氢氧化钡氨水溶)
另几种微溶物,单独记住.
溶解性口诀五
钾钠铵盐硝酸盐
完全溶解困难
氯化亚汞氯化银
硫酸钡硫酸铅
沉淀记间
氢硫酸盐碱类
碳酸磷酸硝酸盐
溶钾钠铵

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蔗糖沉淀
超速离心
具体看病毒大小和密度,改进试剂的浓度,我也在找

如何使用超速离心机浓缩慢病毒

你好,慢病毒转染细胞的操作步骤如下:
1、慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。
2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。
3、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后加入2ml新鲜培养基以稀释polybrene。
4、继续培养24小时,用新鲜培养基替换含有病毒的培养基。
5、继续培养。如果慢病毒含有荧光蛋白,一般转染48小时后可见明显荧光表达,72小时后更加明显。如需FACS检测转染效率,可在转染后72-96小时进行。如果慢病毒含有抗性基因并且需要加药筛选,可以在转染3-4天后开始加药。
二、慢病毒转染悬浮细胞实验方法
1、在2×10^5/ml悬浮细胞中加入polybrene至6 μg/ml和适量病毒,充分混匀。37℃孵育。或者150g室温离心4小时(选作,部分难转染的细胞系采用此步骤可以提高转染效率)。
2、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后(或离心结束后)加入等体积新鲜培养基以稀释polybrene。
3、继续培养3-4天。中间视细胞生长情况可传代或换液。

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